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はじめに 生物物理学における生体膜研究
テーマ4 生物物理
はじめに----生物物理学における生体膜研究----
実験の背景
生体膜
脂質二分子膜
脂質二分子膜の構造と性質
生体膜モデルとしての脂質二分子膜
脂質二分子膜リポソームの形態
蛍光分光の基礎
発光スペクトル
励起スペクトル
量子収率
蛍光寿命
蛍光異方性
溶媒緩和
蛍光の消光
蛍光の共鳴エネルギー移動
波長とエネルギーとの関係
蛍光異方性のミクロ粘性との関係
吸収と発光の遷移双極子モーメントが一致する場合(
)
吸収と発光の遷移双極子モーメントが一致しない場合(
)
蛍光エネルギー移動
実験の概要と目的
実験
蛍光分光器の光学系
スペクトル測定の実験条件
蛍光分光光度計(FP-6300)の使い方
装置の立ち上げ
スペクトルの測定
装置のシャットダウン
偏光子を使った測定
用いる偏光子
波長を固定した測定
蛍光分光光度計(RF-1500)の使い方
装置の立ち上げ
スペクトルの測定
スペクトルの保存とPCへの転送
装置のシャットダウン
試料の調製法
脂質のstock solution(保存溶液)の作り方
脂質リポソームの作り方
器具の洗浄と乾燥
実験操作
[実験0] ピペットマンの較正
[実験1] 水の散乱の測定と、ローダミンBのエタノール溶液の蛍光スペクトルおよび励起スペクトルの測定
[実験2] ローダミンBのグリセリン中での蛍光異方性の励起波長依存性の測定
[実験3]ペリレンのグリセリン溶液の蛍光異方性の測定
[実験4] ペリレンのDPPCおよびDOPC脂質二分子膜リポソーム中での蛍光異方性の測定
[実験5] DOPC脂質二分子膜リポソーム中でのローダミンラベル脂質とNBDラベル脂質間の蛍光エネルギー移動の測定
[実験6] DOPCのSUVリポソームのポリエチレングリコールによる膜融合の観察
計算機によるデータ解析
データのSTEXへのFTPによる転送
gnuplotによるスペクトルデータの表示と解析
ファイルの準備
gnuplotの起動
とにかくプロットしてみる(データをそのままプロットする場合)
規格化してからプロットする
グラフの体裁を整える
グラフをプリンタで印刷する
G因子と蛍光異方性のスペクトル演算
レポートの書き方
レポートの形式
考察の視点
問題
問題1
問題2
参考文献
APPENDIX:各種蛍光プローブと脂質の構造など